Get Adobe Flash player


postheadericon Кузнецов A. E. Научные основы экобиотехнологии . Страница 358

Плазмида pVI150, кодирующая первичный метаболизм фенола, крезолов и 3,4-диметилфенола у Pseudomonas sp. CF600, включает оперон dmp, ответственный за синтез всех ферментов первичного метаболизма этих субстратов, и регуляторный ген, продуктом которого является белок dmpR. Транскрипция dmp-оперона позитивно регулируется белком dmpR, что приводит к экспрессии ферментов катаболизма фенолов только в присутствии этих субстратов.

Плазмиды как объекты генной инженерии позволяют in vitro сконструировать de novo геном клетки, используя эндонуклеазы рестрикции (рестриктазы), передать его в клетки реципиентов конъюгацией, трансформацией или трансдукцией и при включении в клетку большого числа плаз- мидных копий увеличить число необходимых генов. Конструирование и передача генома облегчаются спецификой генетической организации систем биодеградации. Во-первых, они локализуются в трансмиссивных плазмидах, что обеспечивает горизонтальный внутривидовой и межвидовой перено между бактериями. Во-вторых, многим системам биодеградации присущ организация, обеспечивающая рекомбинационное включение генов в новы плазмидные репликоны, а также интегрирование переносимых генов в хрс мосому и получение различных комбинаций генов. Короткие повторяющие ся последовательности в плазмидной ДНК позволяют осуществлять дупли кацию нужных участков на уровне гена (или внутригенные дупликации).

Применение рекомбинантных штаммов с плазмидными векторами био деструкции ограничивается способностью плазмид функционировать толь ко при нейтральном рН среды (Ps. putida, Ps. sp.). Поэтому представляе' интерес разработка методов переноса плазмид, ответственных за деграда цию ксенобиотиков, в ацидофильные или в галофильные штаммы.